ⅠNуклеинска киселинаiвовед
Нуклеинската киселина е поделена на деоксирибонуклеинска киселина (ДНК) и рибонуклеинска киселина (РНК), меѓу кои РНК е поделена на рибозомална РНК (рРНК), гласник РНК (мРНК) и трансферна РНК (тРНК) според нејзините различни функции.ДНК е главно концентрирана во јадрото, митохондриите и хлороформот, додека РНК главно се дистрибуира во цитоплазмата.Како материјална основа на генската експресија, екстракцијата на нуклеинска киселина игра исклучително важна улога во истражувањето на молекуларната биологија и клиничката молекуларна дијагноза.Концентрацијата и чистотата на екстракцијата на нуклеинската киселина директно ќе влијаат на последователните PCR, секвенционирањето, изградбата на вектори, варењето на ензимите и другите експерименти.
Ⅱ Метод на екстракција и прочистување на нуклеинска киселина
① Метод на екстракција на фенол/хлороформ
Екстракцијата на фенол/хлороформ е класичен метод за екстракција на ДНК, кој главно користи два различни органски растворувачи за третирање на примероците, растворање на нуклеинска киселина базирана на ДНК во водната фаза, липиди во органската фаза и протеини помеѓу двете фази.Овој метод има предности на ниска цена, висока чистота и добар ефект.Недостатоците се комплицирана операција и долго време.
② Тризол метод
Методот Тризол е класичен метод за екстракција на РНК.Методот Тризол е поделен на водена фаза и органска фаза по центрифугирање со хлороформ, во која РНК се раствора во водната фаза, водната фаза се пренесува во нова ЕП цевка, се добива талог по додавање на изопропанол, а потоа се прочистува со етанол.Овој метод е погоден за екстракција на РНК од животински ткива, клетки и бактерии.
③ Центрифугална колона метод за прочистување
Методот за прочистување со центрифугирана колона може да ја адсорбира ДНК конкретно преку специјални материјали за адсорпција на силициумска матрица, додека РНК и протеинот може да поминат непречено, а потоа да користат висока сол со низок PH за комбинирање на нуклеинска киселина, елуирање со висока PH вредност со ниска сол за да се оддели и прочисти нуклеинската киселина.Предностите се висока концентрација на прочистување, висока стабилност, нема потреба од органски растворувач и ниска цена.Недостаток е што треба да се центрифугира чекор по чекор, повеќе чекори за работа.
④ Метод на магнетни монистра
Методот на магнетни зрнца е да се подели примерокот на клеточното ткиво преку лизатот, да се ослободи нуклеинската киселина во примерокот, а потоа молекулите на нуклеинската киселина се конкретно адсорбирани на површината на магнетното зрно, додека нечистотиите како што се протеините и шеќерите се оставаат во течноста.Преку чекорите на разделување на клеточното ткиво, врзување на магнетна зрна со нуклеинска киселина, миење на нуклеинска киселина, елуирање на нуклеинска киселина итн., конечно се добива чиста нуклеинска киселина.Предностите се едноставна работа и краткотрајна употреба, без потреба од центрифугирање во чекор.Има ниски технички барања и може да реализира автоматско и масовно работење.Специфичната комбинација на магнетно зрно и нуклеинска киселина ја прави екстрахираната нуклеинска киселина со висока концентрација и чистота.Недостаток е што сегашната пазарна цена е релативно скапа.
⑤ Други методи
Покрај горенаведените четири методи, постојат пукање со вриење, метод на концентрирана сол, метод на анјонски детергент, ултразвучен метод и ензимски метод итн.
Ⅲ Вид на екстракција на нуклеинска киселина
Foregene ја има водечката светска платформа за Direct PCR, платформа за изолација на РНК со двојна колона (само за ДНК + само за РНК).Главните производи вклучуваат комплети за изолација на ДНК/РНК, серии на молекуларни лабораториски реагенси со PCR и директни PCR реагенси.
① Вкупно екстракција на РНК
Вкупните примероци за екстракција на РНК вклучуваат крв, клетки, животински ткива, растенија, вируси итн. Висока чистота и висока концентрација на вкупната РНК може да се добие преку екстракција на вкупна РНК, која може да се користи во RT-PCR, анализа на чипови, ин витро транслација, молекуларно клонирање, Dot Blot и други експерименти.
Foregene поврзаниКомплети за изолација на РНК
Комплет за изолација на тотална РНК на животните--Брзо и ефикасно извлекување на вкупна РНК со висока чистота и висок квалитет од различни животински ткива.
Комплет за изолација на тотална РНК на клетките--Високо прочистена и висококвалитетна вкупна РНК може да се добие од различни култивирани клетки за 11 минути.
Комплет за изолација на тотална РНК на растенијата--Брзо извлечете висококвалитетна вкупна РНК од растителни примероци со ниска содржина на полисахариди и полифеноли.
Комплет за изолација на вирусна РНК-- Брзо изолирајте и прочистувајте ја вирусната РНК од примероци како што се плазма, серум, телесни течности без клетки и супернатанти на клеточна култура.
② Екстракција на геномска ДНК
Примероците за екстракција на геномска ДНК вклучуваат почва, измет, крв, клетки, животински ткива, растенија, вируси итн. Екстракцијата на геномската ДНК може да се користи во дигестија на ензими, изградба на библиотека на ДНК, ПЦР, подготовка на антитела, анализа на вестерн блот хибридизација, генски чип, висока -секвенционирање на пропусната моќ и други експерименти.
Foregene поврзаниКомплети за изолација на ДНК
Комплет за изолација на ДНК од животинско ткиво-- Брзо екстракција и прочистување на геномната ДНК од повеќе извори, како што се животински ткива, клетки итн.
Крвна ДНК Миди комплет (1-5 ml)--Брзо прочистете ја висококвалитетната геномска ДНК од антикоагулирана крв (1-5ml).
Комплет за изолација на ДНК со букален брис/FTA картичка-- Брзо прочистете ја висококвалитетната геномска ДНК од примероците од букален брис/ФТА картичка.
Комплет за изолација на ДНК на растенијата-- Брзо прочистување и добивање висококвалитетна геномска ДНК од растителни примероци (вклучувајќи полисахариди и полифенолни растителни примероци)
③ Плазмидна екстракција
Плазмидот е вид на кружна мала молекула на ДНК во клетките, која е вообичаен носител за рекомбинација на ДНК.Методот на екстракција на плазмид е да се отстрани РНК, да се одвои плазмидот од бактериската геномска ДНК и да се отстранат протеините и другите нечистотии за да се добие релативно чист плазмид.
Генерален мини комплет плазмид--Брзо прочистете ја висококвалитетната плазмидна ДНК од трансформираните бактерии за рутински експерименти со молекуларна биологија како што се трансформација и ензимско варење
④ Други видови екстракција, екстракција на miRNA, итн.
Комплет за изолација на miRNA на животните-- Брзо и ефикасно извлекување на мали РНК фрагменти од 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA од различни животински ткива и клетки
Ⅳ Резултати од барањата за екстракција и прочистување на нуклеинската киселинаs
① Да се обезбеди интегритет на примарната структура на нуклеинската киселина.
② Намалете ја интерференцијата на протеините, шеќерите, липидите и другите макромолекули
③ Не треба да има органски растворувач или висока концентрација на метални јони кои можат да го инхибираат ензимот во примероците на нуклеинска киселина.
④ РНК и друга контаминација на нуклеинска киселина треба да се елиминираат при екстракција на ДНК и обратно.
Време на објавување: 24-11-2022 година
